Банки России

ИФА, ПИФ или ПЦР: какой метод лабораторной диагностики половых инфекций лучше? Диагностика хламидиоза. Иммуноморфологические методы Пиф анализ что

Правильно выбранный ПИФ - залог успешного инвестирования. К сожалению, в этом нелегком деле нет универсальных советов, которые подходили бы каждому инвестору. Зато есть критерии, анализ которых поможет не ошибиться с выбором ПИФа.

Анализ и оценка существующих ПИФов по различным критериям, важнейшими среди которых являются:

проверка лицензии фонда;

время работы фонда на рынке;

доходность ПИФа;

коэффициенты, характеризующие эффективность управления ПИФом;

стоимость чистых активов фонда;

величина издержек.

Рассмотрим каждый из этих критериев подробнее.

Проверка лицензии фонда

Первым делом при выборе ПИФа необходимо уточнить, есть ли у управляющей компании лицензия на осуществление деятельности по управлению паевыми фондами. Инвестора должны насторожить как отсутствие у управляющей компании лицензии, так и просроченная лицензия. В таком случае вполне вероятно использование мошеннических схем. Согласно закону "Об инвестиционных фондах", только наличие лицензии дает право УК осуществлять управление ПИФами и использовать в своем названии слова "управляющая компания" и "паевой фонд".

Время работы фонда на рынке

При выборе ПИФа в обязательном порядке необходимо учитывать его время работы на рынке. При том, что индустрия коллективных инвестиций существует в России всего 10 лет, для ПИФа 5 лет работы на рынке - очень хороший показатель. Таким сроком работы могут похвастаться около 50 ПИФов, среди которых: "Добрыня Никитич", "Петр Столыпин", "Паллада - фонд акций второго эшелона", "Лукойл Фонд перспективных вложений", "Мономах Энергия", "Альфа-Капитал", "Солид-Инвест" и др. Не рекомендуется инвестировать в ПИФы, работающие на рынке менее двух лет, так как небольшой срок существования ПИФа вызовет затруднения при объективной оценке его результатов. Как правило, чем дольше существует фонд, тем большее информации и статистических данных о его работе будет доступно. Единственным видом ПИФов, для которых можно не учитывать время работы на рынке, являются индексные ПИФы. В силу своей специфики (по своей структуре они практически полностью повторяют тот или иной индекс) индексные ПИФы полностью зависят от состояния фондового рынка и экономики в целом. И время работы тут совсем ни при чем. Не следует совершать классической ошибки начинающих пайщиков и покупать паи недавно сформированного ПИФа, руководствуясь его высокой доходностью. По статистике, большинство вновь сформированных фондов в первый год работы показывают хорошие результаты, но очень немногие могут повторить их в дальнейшем. Эксперты склонны винить во всем рост активов фондов, ведь портфель со временем становится большим и неповоротливым, и управлять им все сложнее.

Доходность ПИФа

Доходность ПИФа - именно тот критерий, на который так падки начинающие инвесторы. Кажется, раз в том году фонд показал отличные результаты, почему бы и в этом году ему не сработать так же замечательно? Увы! Жестокая статистика доказывает, что ни один фонд-лидер не становился лидером несколько лет подряд. Был в десятке лучших - да, но не лидер. Доходность фонда выражается в процентном увеличении стоимости пая. Естественно, при анализе и оценке ПИФов без доходности никуда, но нельзя возводить ее в ранг абсолютного критерия и принимать решения, основываясь только на доходности фондов. Ведь, как написано везде мелким шрифтом: "Доходность, показанная фондом в прошлом, не являются гарантией того, что такая же доходность будет показана в будущем". Тем более нельзя безоговорочно доверять рекламе, обещающей сотни процентов годовых. Не забывайте, что последние несколько лет были годами роста, и высокие доходности ПИФов - это в большинстве случаев не только результат работы управляющих менеджеров. Грамотный инвестор сравнит динамику стоимости пая того или иного ПИФа с динамикой индексов РТС и ММВБ и сможет оценить, смогли ли управляющие обыграть рынок или они систематически проигрывали рынку. На самом деле, ПИФов, обыгрывающих рынок, совсем не много, поэтому если фонд идет с рынком "ноздря в ноздрю" - это уже неплохо. Доходность может стать критерием для выбора ПИФа только тогда, когда это стабильная доходность, то есть на протяжении долгого времени (хотя бы 2 - 3 лет), фонд показывает постоянную доходность. И наконец, не следует забывать, что доходность и риск ходят рука об руку. Польстившись на высокую доходность, нужно понимать, что в случае спада на рынке можно потерять значительную часть капитала. Так что доходность доходностью, а про коэффициенты тоже забывать не следует.

Стоимость чистых активов (СЧА)

Стоимость чистых активов ПИФа - это количество денег пайщиков, которые находятся под управлением фонда. С одной стороны, большая СЧА делает портфель фонда громоздким и неповоротливым, а с другой стороны, позволяет осуществлять более крупные вложения. Так что следуем принципу - чем больше СЧА, тем лучше ПИФ. Кроме того, большая СЧА, как правило, свидетельствует о популярности ПИФа и его хорошей репутации.

В любом случае, сумма чистых активов не является решающим критерием при выборе ПИФа.

Величина издержек

Федеральным законом "Об инвестиционных фондах" установлено, что расходы управляющей компании по управлению паевым фондом могут составлять не более 10% среднегодовой стоимости чистых активов фонда. То есть на вознаграждение управляющей компании, на оплату услуг депозитария, оценщика, аудитора и прочих с пайщика не должно взиматься более 10% от стоимости принадлежащих ему паев. Размер скидок и надбавок также ограничен. Максимальный размер надбавки не может составлять более 1,5% стоимости пая, а максимальный размер скидки - более 3%. На фоне ужесточающейся конкуренции многие управляющие компании стараются минимизировать свои расходы для привлечения инвесторов. Естественно, что чем меньше издержки ПИФа, тем больше доход пайщика. Но с другой стороны, не стоит прельщаться малыми издержками, особенно если речь идет о начинающей управляющей компании. Лучше не экономить пару процентов и доверить свои деньги надежной и авторитетной управляющей компании.

Диагноз «хламидиоз» нельзя поставить только по симптомам. Точно определить эту болезнь помогают лабораторные анализы. Почти каждая лаборатория предлагает несколько анализов на хламидиоз. Но как не запутаться в многочисленных методах и точно определить хламидиоз? Рассказываем про каждый из них и разбираемся, в чем плюсы и минусы.

Как можно и как нельзя диагностировать хламидиоз?

У каждого метода есть свои особенности, а некоторые вообще нельзя назвать эффективными. Поэтому давайте выясним, что подходит для определения хламидиоза, а что не стоит принимать всерьез.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Это один из самых надежных анализов на хламидии. Он обнаруживает бактерию с почти 100% точностью.

По присутствию антител, а также по их количеству можно понять: есть ли у человека хламидии и какой стадией хламидиоза (острой или хронической) он болен. Также ИФА помогает определить, удачно ли прошло лечение, если анализ сдают в качестве контрольного.

Важно помнить, что этот способ очень ненадежен. Если есть выбор, лучше воспользоваться более точными методами.

Микроскопия мазка (она же бактериоскопия) по Граму

Этот метод вообще не может обнаруживать хламидий — поэтому очень важно отличать его от других, чтобы не делать бессмысленный анализ.

Микроскопия мазка — это анализ выделений человека (вагинальной слизи, спермы и других) под микроскопом с помощью другого окрашивания — по методу Ганса Грама. Именно его проводят все платные лаборатории под названием «общий мазок», «микроскопия», или «бактериоскопия».

Окрашивание по Граму позволяет увидеть разные бактерии, которые без краски незаметны под микроскопом. Также он помогает посчитать лейкоциты — вид иммунных клеток человека. Но увы: метод Грама не может выявлять хламидий, потому что они просто не окрашиваются таким способом.

Анализ годится только в качестве дополнительного — чтобы оценить общее состояние конкретного органа, или при подозрении на другие заболевания.

Хламидиоз с помощью микроскопии мазка по Граму установить никак нельзя!

Мини-тест (экспресс-тест на хламидии)

Этот метод полностью бесполезен. Про него стоит знать, только чтобы не выкидывать деньги на ветер.

Анализ можно купить в аптеке и провести самостоятельно в домашних условиях. По механизму действия он очень схож с тестом на беременность: в лунку наносится несколько капель мочи или слизи из вагины, затем результат оценивают по числу полосок.

В инструкции говорится, что, если у человека есть хламидии, тест покажет две полоски.

Однако отрицательный результат теста совсем не гарантирует, что болезни нет на самом деле. Положительный, впрочем, тоже недостоверен. По сути, анализ не сообщает ничего полезного. Поэтому при подозрении на хламидиоз разумнее сдать более точные анализы.

В качестве итога рассмотрим сравнительную таблицу всех анализов на хламидиоз:

Достовер-

Материал Цена*
ПЦР Мазок или соскоб, моча

В крови могут содержаться и косвенные признаки хламидий — антитела к ним; а иногда — и сами хламидии, если инфекция попала в кровоток. Специальной подготовки, чтобы сдать анализ крови на хламидии не требуется. Правильнее всего сдавать кровь на голодный желудок, или хотя бы спустя 4 часа после еды. Антитела исследуются с помощью ИФА , а сами хламидии — с помощью ПЦР . Если в крови обнаружены сами хламидии — важно понимать, что это серьезное состояние. Из кровотока бактерии могут попасть в любой орган, где есть слизистые оболочки, и начать там размножаться.

Как подготовиться к анализу на хламидии?

Чтобы результаты анализов были достоверны, требуется не только опыт врачей и лаборантов, но и ответственность самих пациентов: есть правила, которые нельзя нарушать. Рассмотрим, как правильно сдавать кровь на хламидиоз и как подготовиться к мазку на хламидии женщинам (в том числе беременным) и мужчинам.

Обследование на хламидиоз нужно проводить до того, как человек начал принимать антибиотики. Причина в том, что антибактериальные препараты убивают хламидий или «загоняют» в скрытую форму. Значит, обнаружить бактерии после такого лечения будет очень трудно. Если человек принимал любые антибиотики за несколько дней до сдачи анализов (например, лечил ангину), то первый тест рекомендуется сдавать только через месяц после приема последней таблетки.

    Если пациент ранее лечился местными антибактериальными препаратами (мазями, кремами, растворами антисептиков), то первый анализ рекомендуется сдавать только через 2 недели после лечения.

    Cдавать материал из мочеиспускательного канала (слизь/мочу) как мужчинам, так и женщинам нужно либо до мочеиспускания, либо через 3 часа после него.

    Анализ на хламидиоз у женщин проводят между менструациями: не позже, чем за 5 дней до менструации, или не раньше, чем через 5 дней после нее. Желательно, чтобы материал для анализа брали в первую половину цикла. Однако, если у женщины есть признаки сильного воспаления, то имеет смысл сдать анализ как можно быстрее, исключая только период самой менструации. За день до анализа нельзя проводить никакие спринцевания влагалища.

    УЗИ), мужчинам — в уретру.

    Беременные женщины сдают анализы по тем же правилам, что и женщины, не ожидающие ребенка. Разумеется, на них не распространяются ограничения, связанные с менструальным циклом.

В каких случаях проверяются на хламидиоз: основные показания

Основными причинами, по которым человеку стоит сдать анализы на хламидиоз, являются:

    острое или хроническое воспаление: мочеиспускательного канала, шейки матки, влагалища, прямой кишки, конъюнктивы глаза, ротоглотки, легких (пневмония или бронхиолит — у детей);

    подозрение на бытовое или половое заражение хламидиозом — даже если симптомов при этом нет (бессимптомная форма);

    беременность, при ее осложнениях: воспаления шейки матки, влагалища, мочеиспускательного канала, при болях в животе.

    более серьезные проблемы с беременностью: выкидыш, замершая беременность, другие выкидыши в прошлом;

    бесплодие.

Примеры настоящих анализов

Когда все результаты анализов приходят положительными, поставить диагноз нетрудно. Но как быть, если они противоречат друг другу? Строгих схем для диагностики хламидиоза нет. Чтобы правильно поставить диагноз, разные врачи используют разные методы и их сочетания.

Для наглядности рассмотрим примеры диагнозов у реальных пациентов:

Среди большого разнообразия лабораторных методов важно знать, как правильно провериться на хламидиоз. Пожалуй, основное правило: к диагностике хламидиоза нужно подходить комплексно — использовать несколько видов анализов и сопоставлять их результаты. Также помните, что оценивать результаты анализов, как и назначать лечение, должен только врач.

Из существующих анализов разумнее выбирать самые точные — ПЦР , ИФА и бактериальный посев. Те же анализы хорошо подойдут и для оценки результатов лечения. Главное — помнить, что ПЦР нет смысла сдавать раньше, чем через месяц после курса антибиотиков.

32 798

Как известно, всякая болезнь имеет свои, присущие только ей, признаки. Но это не имеет никакого отношения к хламидиозу.
Хламидиоз – это болезнь, которая не имеет чётких симптомов, присущих только ей, а иногда и вовсе протекает бессимптомно. И даже если какие-то проявляются, то чаще всего они схожи с признаками других ЗППП.
Поэтому для постановки диагноза решающими являются лабораторные методы исследования. В отличие от многих других заболеваний диагноз хламидиоз – чисто лабораторный.

Кто, прежде всего, должен обследоваться на хламидиоз?

  • Мужчины и женщины, имеющие много половых партнеров, особенно случайных.
  • Лица, у половых партнёров которых обнаружен хламидиоз, даже при отсутствии жалоб и симптомов. Ведь осложнения хламидиоза могут развиваться даже при его бессимптомном течении. Риск заражения партнера составляет около 90%.
  • Женщины, страдающие бесплодием более 2 лет, даже в том случае, если половой партнёр обследован и здоров.
  • Женщины с эрозиями шейки матки, цервицитами, воспалением яичников (особенно при планировании беременности). Причем влагалищный мазок при этом может быть нормальный.
  • Женщины с нарушением протекания беременности: самопроизвольные выкидыши, преждевременные роды, многоводие, повышение температуры неясного происхождения во время настоящей беременности.

Что исследуют?
Для обнаружения хламидий необходимо произвести забор материала. Это может быть соскоб, содержащий клетки больного органа — влагалища, шейки матки, секрет простаты, соскоб из уретры, конъюнктивы глаза. Таким материалом также может быть кровь, моча и сперма у мужчин.

Какие анализы назначают при хламидиозе и насколько они могут быть полезны?
Сначала мы остановимся на возможных методах обследования, а затем сделаем вывод, какие из них наиболее предпочтительны.

2. Иммуноцитологический анализ — Реакция прямой иммунофлюоресценции (РИФ или ПИФ).
Этот метод предусматривает прямое выявление антигенов хламидий. Для этого материал, полученный при соскобе, обрабатывают специальными антителами, которые непосредственно обработаны флуоресцирующим веществом. Эти антитела связываются со специфическими антигенами хламидий. Затем при люминесцентной микроскопии хламидийные включения в клетках определяют по зелёному или желто-зеленому свечению.
Иммуноцитологический метод используется как при острой, так и при хронической фазе заболевания.
Существенным недостатком РИФ является большое количество ложноотрицательных и ложноположительных результатов. Ложноотрицательные результаты чаще всего связаны с нарушением правил забора биологического материала. Ложноположительные результаты могут быть следствием сочетанных инфекций урогенитального тракта, когда вместе с хламидией присутствует другая микробная флора. Кроме всего прочего, РИФ носит очень субъективный характер, т.к. зависит от опыта и личной оценки лаборанта. Поэтому РИФ дает очень высокий процент ложноположительных результатов и не может считаться достоверным. Недостатком РИФ также является то, что с её помощью нельзя оценить результаты лечения.
При урогенитальном хламидиозе точность метода составляет около 50%.

3. Иммуноферментный анализ (ИФА).
ИФА является методом непрямого выявления бактерий, т.е. возбудитель не обнаруживается непосредственно, а определяются специфические антитела (IgG, IgA, IgM) к нему. В основе метода лежит способность иммунной системы вырабатывать антитела (иммуноглобулины , Ig ) в ответ на внедрение чужеродных агентов.
Преимущества ИФА заключаются в том, что он позволяет не только выявить возбудителя заболевания, но также определить на какой стадии оно находится (острой или хронической) и оценить эффективность проведенного лечения. Преимуществом также является автоматизация метода и быстрота его проведения.

Как оценивают результаты?
При инфицировании хламидиями специфические антитела появляются на 5-20-й день заболевания. При этом появление каждого класса антител происходит на определённой стадии заболевания.

  • При первичном инфицировании сначала появляются IgМ, затем – IgA, и в последнюю очередь – IgG.
  • Самыми первыми после первичного инфицирования (через 5 дней) появляются IgM, которые защищают организм от возможного распространения инфекции. Они являются маркерами острой стадии заболевания. К 10-му дню количество IgM в крови достигает пика. Затем их уровень начинает снижаться, и появляются IgA. В течение небольшого периода времени могут обнаруживаться параллельно IgM и IgA антитела . Этот период свидетельствует о разгаре инфекционного процесса.
  • IgA можно обнаружить через 10 дней от момента появления первичных симптомов заболевания. Они защищают слизистые оболочки от проникновения бактерий глубоко в ткани. Высокий уровень IgA в выделениях слизистых оболочек говорит о хорошо функционирующем местном иммунитете.
  • Затем, через 15 — 20 дней после внедрения в организм Chlamydia trachomatis в крови появляются IgG, а уровень IgA снижается.
  • Острый первичный процесс характеризуется высоким уровнем (титром) IgM в сочетании с низким титром IgG.
  • При повторном заражении отмечается быстрое нарастание титра IgG и IgА и практически полное отсутствие IgM.
  • При хроническом течении выявляются специфические IgG и А, концентрации которых не изменяются на протяжении длительного времени.
  • При излечении через 1,5-2 месяца IgA и IgM в крови не обнаруживаются, а IgG могут сохраняться в течение нескольких лет, однако их уровень снижается в 4-6 раз.
  • Длительно обнаруживаемые IgG указывают на перенесённую хламидийную инфекцию.
  • При обострении хламидиоза количество IgA и IgG увеличивается в несколько раз.
  • Эффективность проведенного лечения определяется по наличию IgA. Если через 2 месяца после курса лечения в крови обнаруживаются IgA — это означает, что инфекция осталась.

Необходимо отметить, что специфические антитела , вырабатываемые к хламидиям, не обеспечивают стойкого иммунитета против них.
Точность этого анализа на хламидиоз составляет около 70 %. Это связано с тем, что антитела к хламидиям могут присутствовать и у здоровых людей вследствие ранее перенесенного заболевания, а также определяться при респираторных и других видах хламидийных инфекций.

4. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).
С помощью ПЦР выявляется специфический участок или фрагмент ДНК хламидий в исследуемом материале, поэтому в сравнении с другими методами спутать хламидии с какой-то другой инфекцией невозможно. Он эффективен как в острой, так и в хронической фазе заболевания. При этом для анализа нужно совсем немного материала, результаты же готовы уже через 1-2 дня.
Для ПЦР исследования материалом может быть соскоб из уретры или цервикального канала, секрет предстательной железы, осадок мочи, соскоб с конъюнктивы глаз, кровь.
При диагностике первичного заражения более информативным является выявление данной инфекции в местах изначальной локализации, т.е. материалом должны быть соскобы из половых путей. Ложноположительные результаты ПЦР могут быть в случае нарушения процесса забора, транспортировки материала и проведения самого анализа.

Важно! Для оценки эффективности лечения ПЦР исследование нельзя проводить ранее чем через месяц после курса антибиотикотерапии, т.к. можно получить ложноположительные результаты. Это связано с тем, что при выявлении фрагмента ДНК хламидии невозможно оценить, насколько жизнеспособна сама микробная клетка. В этом случае жизнеспособность хламидий, а также связанная с ней возможность рецидивов болезни оценивается с помощью микробиологического метода. Если хламидия нежизнеспособна, то, несмотря на наличие фрагмента ДНК, микробные клетки не будут расти в клеточной культуре.
На сегодняшний день точность этого методы является самой высокой — до 100 %.
Данный метод рекомендован как предпочтительный в диагностике хламидийной инфекции.

5. Микробиологическое исследование (культуральный метод) с определением чувствительности к антибиотикам.
Суть этого метода состоит в том, что исследуемый материал высевается на специальную среду и выращивается. Затем по характеру роста и другим признакам идентифицируется возбудитель. Культуральный метод является наиболее чувствительным, он позволяет не только выявить жизнеспособные хламидии, но и подобрать антибиотик, к которому чувствителен данный микроорганизм.
Материалом для исследований может служить соскоб из уретры, шейки матки, секрет простаты, соскоб с конъюнктивы глаза.
За месяц до исследования нельзя применять антибиотики.
Микробиологическое исследование предпочтительнее проводить в следующих случаях:

  • Для оценки эффективности проведенного антибактериального лечения.
  • Для выявления чувствительности к антибактериальным препаратам.
  • Для выявления хламидий у лиц с иммунодефицитами (ВИЧ инфицированные, онкологические больные после лучевой и химиотерапии, лица, получающие иммунодепрессанты, др.).

Недостатками культурального метода диагностики хламидиоза являются трудоемкость, дороговизна и длительность исследования. Также необходимо особое оснащение лаборатории и очень высокая квалификация персонала. Кроме того, данный метод, как никакой другой, требует безукоризненного соблюдения правил при заборе материала, транспортировке и хранении.
Реальный срок получения результатов этим методом – не менее семи дней.
Выявляемость хламидий при посеве составляет до 90 %.

6. Экспресс-диагностика.
В основе всех методов экспресс-диагностики хламидиоза лежит ферментспецифическая реакция и иммунохроматография. Для этого используются специальные наборы для экспресс-диагностики, которые позволяют визуально оценивать результаты уже через 10-15 минут. Это очень быстрый и удобный метод, но его точность составляет всего 20-25 %.

Выводы.

  • Не существует ни одного метода, который бы в 100% случаев выявлял хламидии. Поэтому в большей части случаев лабораторная диагностика должна включать в себя сочетание не менее двух методов.
  • Самые чувствительные анализы на хламидиоз — ПЦР (ДНК — диагностика) и микробиологический анализ. Они являются «юридическим стандартом» при диагностике хламидиоза.
  • В случае первичного заражения до применения антибиотиков чаще всего достаточно одного ПЦР исследования.
  • При хронических процессах — ПЦР или микробиологический тест, или РИФ+ИФА.
  • При вероятности перехода возбудителя в L-форму – ИФА.
  • Для оценки эффективности лечения в идеале используется микробиологическое исследование. При невозможности его проведения – ПЦР + ИФА.
  • Для определения стадии болезни – ИФА.
  • У больных с иммунодефицитами ИФА не информативен, в идеале использовать микробиологический метод.
  • Не стоит особо полагаться на результаты по определению чувствительности хламидий к антибиотикам. Ведь, как известно, микроорганизмы ведут себя по-разному в пробирке (in vitro) и в живом организме(in vivo).

Хламидийная инфекция вызывается Chlamydia trachomatis – грамотрицательной бактерией, принадлежащей семейству Chlamydiaceae . Вид Chlamydia trachomatis включает различные серовары, которые вызывают отдельные нозологические формы заболеваний. Сероваровы A, B, C вызывают трахому, L1, L2, L3 – венерическую лимфогранулему. Наибольшее распространение в странах Европы, Южной и Северной Америки и в России получили серовары D–K, которые передаются при половых контактах и вызывают урогенитальную хламидийную инфекцию (УХИ). Возможна перинатальная передача с развитием у новорожденных конъюнктивита или пневмонии. C.trachomatis имеет уникальный среди других возбудителей ИППП жизненный цикл. Инфицирование эпителиальных клеток происходит метаболически неактивными формами хламидий – элементарными тельцами (ЭТ). Внутри клеток ЭТ трансформирутся в ретикулярные тельца (РТ) – метаболически активные, делящиеся формы. Накопление внутри эпителиальных клеток новых генераций РТ и их параллельная трансформация обратно в ЭТ истощает ресурсы клеток хозяина, приводя их к гибели, высвобождению ЭТ и новому циклу инфицирования. Неосложненная хламидийная инфекция протекает у мужчин чаще всего в форме уретрита, у женщин – в форме слизисто-гнойного цервицита. Симптомы и проявления УХИ неспецифичны, для постановки диагноза УХИ необходимы лабораторные исследования для выявления возбудителя или его маркеров. Значительная часть случаев УХИ – от 40 до 60% протекает в бессимптомной или малосимптомной форме и проявляется уже на стадии осложнений. Основными осложнениями УХИ являются: эпидидимит, эндометрит, сальпингит, сальпингоофорит, внематочная беременность, трубное бесплодие, болезнь Рейтера.

Показания к назначению лабораторных исследований. У мужчин: наличие симптомов и клинических проявлений уретрита, эпидидимита или эпидидимоорхита; у лиц, практикующих аногенитальные контакты – проктита; при физикальном осмотре – наличие выделений из уретры.

У женщин: наличие симптомов воспалительного процесса в нижних отделах урогенитального тракта и органах малого таза, боли в низу живота, патологические выделения из влагалища; наличие слизистых или слизисто-гнойных выделений из цервикального канала, нарушение менструального цикла, болезненность при половых контактах; подготовка к хирургическому вмешательству на органах малого таза; подготовка к беременности, отягощенный акушерско-гинекологический анамнез, связанный с инфекционной патологией.

У лиц обоего пола без симптомов и признаков воспалительного процесса урогенитального тракта: наличие перечисленных выше симптомов и признаков или установленная УХИ у полового партнера; в возрастной группе до 25 лет – многочисленные половые партнеры или половые контакты с новым половым партнером без барьерной контрацепции.

Дифференциальная диагностика. Гонорея, урогенитальный трихомониаз, инфекция, вызванная M.genitalium .

Этиологическая диагностика включает визуальное обнаружение C.trachomatis , выделение культуры C.trachomatis , выявление АГ, ДНК и РНК C.trachomatis и АТ к микроорганизму.

Материал для исследований

  • Мазки/соскобы со слизистых оболочек цервикального канала и уретры женщин – микроскопические исследования, культуральные исследования, выявление АГ, обнаружение ДНК, РНК;
  • мазки/соскобы со слизистой влагалища, мазки (соскобы) со слизистой прямой кишки – выявление ДНК, РНК;
  • мазки/соскобы с конъюнктивы глаз – культуральные исследования, выявление ДНК;
  • моча (у мужчин) – выявление ДНК;
  • сыворотка крови – выявление АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Для визуального выявления C.trachomatis возможно применение световой или люминесцентной микроскопии. При применении световой микроскопии используется фиксированный препарат биологического материала, окрашенный по Романовскому- Гимзе, в котором выявляют измененные клетки цилиндрического эпителия, содержащие ЭТ и РТ C.trachomatis , получившие название телец ГальберштедтераПровачека. Диагностическая чувствительность исследования не превышает 10%. Распространенным приемом выявления хламидий является определение АГ микроорганизма методом ПИФ. С помощью люминесцентной микроскопии в препарате, обработанном флуоресцентно-меченными АТ к хламидиям, по характерному свечению обнаруживаются ЭТ C.trachomatis . Микроскопические исследования, в первую очередь ПИФ, достаточно просты в исполнении и не требует дорогостоящего оборудования, однако весьма требовательны к качеству полученного биологического материала, технике нанесения препарата на стекло и специфичности используемых АТ. Материал для выполнения ПИФ должен содержать достаточное количество клеток цилиндрического эпителия, его получают из цервикального канала (по показаниям – из уретры) и у мужчин из передней уретры. Для интерпретации результата необходимо наличие в препарате не менее 5–10 клеток цилиндрического эпителия (отражает качество получения биоматериала) в поле зрения и не менее 10 флуоресцирующих ЭТ. Диагностическая чувствительность метода ПИФ варьирует в широких пределах – от 10 до 65%. Максимальная чувствительность и специфичность метода отмечена у пациентов с клиническими проявлениями инфекции и высокой бактериальной нагрузкой, минимальная – при бессимптомных или малосимптомных формах.

Для культивирования C.trachomatis в условиях in vitro используются чувствительные к микроорганизму эукариотические клеточные линии – HeLa, McCoy, L-929, в которых происходит развитие хламидий. В процессе исследования ЭТ, содержащиеся в биологическом материале, инфицируют чувствительные клетки культуры и размножаются в них. Через 48–72 часа после заражения в культуре накапливаются клетки, содержащие включения – размножившиеся РТ и ЭТ. Результат культурального исследования оценивается визуально при использовании метода ПИФ с помощью люминесцентной микроскопии. Культуральный метод долгое время рассматривался в качестве «золотого стандарта» диагностики, поскольку обладал большей чувствительностью по сравнению с методом световой микроскопии и иммунологическими методами при практически 100% специфичности. Однако эффективность метода в значительной степени зависит от состояния используемой клеточной линии – ее жизнеспособности и восприимчивости к инфицированию хламидиями, на которые могут оказывать негативное влияние продукты жизнедеятельности, содержащиеся в биологическом материале, антибиотики, местные бактерицидные препараты, химические компоненты урогенитальных зондов и тампонов, и др. Другим важным условием является сохранение жизнеспособности самих хламидий в исследуемом биологическом материале. Диагностическая чувствительность метода с учетом указанных выше факторов варьирует от 40 до 85%.

Для выявления АГ C.trachomatis за рубежом был разработан ряд тестов на основе ИФА. Диагностическая чувствительность выявления АГ C.trachomatis находится в пределах 55–78%. Указанные тесты получили широкое распространение в зарубежной лабораторной практике, однако в РФ не применяются.

Выявление АТ классов IgA, IgM и IgG к АГ C.trachomatis в крови осуществляется методами МИФ или ИФА. Метод МИФ рассматривается как «золотой стандарт » определения АТ к АГ хламидий, он позволяет проводить серотипирование. При определении АТ IgM МИФ обладает большей чувствительностью, чем ИФА, что важно при диагностике хламидийной инфекция у новорожденных. Однако исследование достаточно трудоемко и требует дорогостоящих высокоочищенных АГ C.trachomatis , поэтому метод ИФА получил наибольшее распространение в международной и отечественной практике Выявление АТ IgA может свидетельствовать о наличии острой или обострении хронической инфекции. Для правильной оценки результатов определения АТ с помощью ИФА необходимо учитывать несколько важных условий. При неосложненной УХИ основную роль играет местное звено иммунной системы с участием специфических и неспецифических факторов. На сроки появления и уровень циркулирующих в крови АТ влияют индивидуальная иммунологическая реактивность организма, сроки инфицирования, продолжительность инфекции, повторные случаи инфицирования, уровень бактериальной нагрузки и целый ряд других факторов. Поэтому АТ в крови могут появляться в срок от нескольких недель до нескольких месяцев после инфицирования. Элиминация АТ может происходить в течение нескольких лет или же сохраняться практически на всю жизнь.

Для выявления ДНК C.trachomatis в РФ используют преимущественно ПЦР с различными вариантами детекции продуктов реакции и метод выявления РНК C.trachomatis на основе НАСБА. Диагностическая чувствительность метода ПЦР для диагностики УХИ находится в пределах от 90 до 98%, специфичность достигает 96–98%. Диагностическая чувствительность метода НАСБА достигает 98%, диагностическая специфичность – до 100%.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Микроскопическое исследование препаратов с окраской по Романовскому-Гимзе в настоящее время не используется и не рекомендуется для диагностики УХИ. В то же время, всем пациентам с симптомами и клиническими проявлениями урогенитальной инфекции показано микроскопическое исследование с окраской по Граму для установления лабораторных признаков воспаления (повышенное содержание ПМЯЛ).

Применение метода ПИФ целесообразно в качестве метода быстрой диагностики при наличии у пациентов выраженных проявлений инфекционно-воспалительного процесса в урогенитальном тракте при условии соблюдения всех требований получения биологического материала. Метод не подходит для скрининга, диагностики хронических форм хламидийной инфекции, контроля лечения и исследования образцов мочи и слизистой влагалища, прямой кишки, ротоглотки.

С учетом того, что для проведения культурального исследования необходима технология ведения эукариотических клеточных линий и соответствующие для этого лабораторные условия, то применение метода в рутинной лабораторной практике ограничено. Метод в первую очередь имеет большое значение в научных исследованиях, когда требуется выделить живой возбудитель для его дальнейшего изучения.

Определение АТ к C.trachomatis может быть использовано для эпидемиологических исследований, с целью интегральной оценки доли лиц в популяции, контактировавшей с C.trachomatis . В клинической практике определение АТ показано при ретроспективном анализе возможной хламидийной этиологии при бесплодии, длительных хронических воспалительных процессах урогенитального тракта. Однако и в этом случае положительные результаты обнаружения АТ должны рассматриваться в контексте других клинических, анамнестических и лабораторных данных.

В настоящее время выявление ДНК методом ПЦР считаются основой лабораторной диагностики УХИ. Исследование показано и для контроля результатов лечения. При использовании метода ПЦР с учетом скорости элиминации ДНК C.trachomatis контроль лечения необходимо проводить не ранее 3–4 недель. РНК возбудителя является более ранним маркером ответа на терапию, поэтому с помощью метода НАСБА можно оценивать эффективность лечения через 1–2 недели после окончания курса.

Особенности интерпретация результатов лабораторных исследований. Результаты, полученные методом ПИФ, рекомендуется подтверждать с помощью культурального или молекулярно-биологических методов.

Положительные результаты культурального исследования не требуют дополнительного подтверждения и означают наличие инфекции. Отрицательный результат означает как отсутствие возбудителя, так и может свидетельствовать о неоптимальных условиях для его культивирования.

При обнаружении ДНК C.trachomatis у пациентов с клинической симптоматикой урогенитальной инфекции или наличии факторов, способствующих инфицированию, дополнительного исследования не требуется, диагноз урогенитальной инфекции считается установленным. У пациентов, у которых обнаружена ДНК C.trachomatis , но отсутствуют субъективные и объективные признаки инфекционно- воспалительного заболевания и факторы риска, для подтверждения диагноза рекомендуется провести исследование для выявления РНК C.trachomatis методом НАСБА. Наличие ДНК и РНК патогена является объективным лабораторным признаком инфекции.

При оценке результатов выявления АТ следует учитывать, что их наличие или отсутствие не отражает наличие или отсутствие инфекции в данный момент времени.