Банки Росії

ІФА, ПІФ чи ПЛР: який метод лабораторної діагностики статевих інфекцій кращий? Діагностика хламідіозу. Імуноморфологічні методи Піф аналіз що

Правильно обраний ПІФ – запорука успішного інвестування. На жаль, у цій нелегкій справі немає універсальних порад, які б підходили кожному інвестору. Проте є критерії, аналіз яких допоможе не помилитися з вибором ПІФу.

Аналіз та оцінка існуючих ПІФів за різними критеріями, найважливішими серед яких є:

перевірка ліцензії фонду;

час роботи фонду над ринком;

прибутковість ПІФу;

коефіцієнти, що характеризують ефективність управління ПІФ;

вартість чистих активівфонду;

величина витрат.

Розглянемо кожен із цих критеріїв докладніше.

Перевірка ліцензії фонду

Насамперед при виборі ПІФу необхідно уточнити, чи є у керуючої компаніїліцензія на провадження діяльності з управління пайовими фондами. Інвестора повинні насторожити як відсутність у компанії, що управляє ліцензії, так і прострочена ліцензія. У такому випадку цілком ймовірно використання шахрайських схем. Відповідно до закону "Про інвестиційних фондах", лише наявність ліцензії дає право КК здійснювати управління ПІФами та використовувати у своїй назві слова "керівна компанія" та "пайовий фонд".

Час роботи фонду на ринку

При виборі ПІФу обов'язково необхідно враховувати його час роботи над ринком. При тому, що промисловість колективних інвестицій існує в Росії всього 10 років, для ПІФу 5 років роботи на ринку - дуже непоганий показник. Таким терміном роботи можуть похвалитися близько 50 ПІФів, серед яких: "Добриня Микитович", "Петро Столипін", "Паллада - фонд акцій другого ешелону", "Лукойл Фонд перспективних вкладень", "Мономах Енергія", "Альфа-Капітал", " Солід-Інвест" та ін. Не рекомендується інвестувати в ПІФи, що працюють на ринку менше двох років, так як невеликий термін існування ПІФу спричинить труднощі при об'єктивній оцінці його результатів. Як правило, чим довше існує фонд, тим більше інформації та статистичних даних про його роботу буде доступним. Єдиним видом ПІФів, котрим можна не враховувати час роботи над ринком, є індексні ПІФи. Через свою специфіку (за своєю структурою вони практично повністю повторюють той чи інший індекс) індексні ПІФи повністю залежать від стану фондового ринкута економіки в цілому. І час роботи тут зовсім ні до чого. Не слід робити класичної помилки пайовиків-початківців і купувати паї нещодавно сформованого ПІФу, керуючись його високою прибутковістю. За статистикою, більшість новосформованих фондів у перший рік роботи показують хороші результати, але мало хто може повторити їх надалі. Експерти схильні звинувачувати у всьому зростання активів фондів, адже портфель згодом стає більшим і неповоротким, і керувати ним усе складніше.

Прибутковість ПІФу

Прибутковість ПІФу - саме той критерій, на який так ласі початківці інвестори. Здається, раз того року фонд показав відмінні результати, чому б і цього року йому не спрацювати так само чудово? На жаль! Жорстока статистика доводить, що жоден фонд-лідер не ставав лідером кілька років поспіль. Був у десятці найкращих – так, але не лідер. Прибутковість фонду виражається у відсотковому збільшенні вартості паю. Звичайно, при аналізі та оцінці ПІФів без прибутковості нікуди, але не можна зводити її в ранг абсолютного критерію і приймати рішення, ґрунтуючись лише на прибутковості фондів. Адже, як скрізь написано дрібним шрифтом: "Прибутковість, показана фондом у минулому, не є гарантією того, що така ж прибутковість буде показана в майбутньому". Тим більше не можна беззастережно довіряти рекламі, яка обіцяє сотні відсотків річних. Не забувайте, що останні кілька років були роками зростання, і високі прибутковості ПІФів - це здебільшого як результат роботи керівників менеджерів. Грамотний інвестор порівняє динаміку вартості паю того чи іншого ПІФу з динамікою індексів РТС та ММВБ та зможе оцінити, чи змогли керуючі обіграти ринок чи вони систематично програвали ринку. Насправді, ПІФів, які обіграють ринок, зовсім не багато, тому якщо фонд йде з ринком "ніздря в ніздрю" - це вже непогано. Прибутковість може стати критерієм для вибору ПІФу лише тоді, коли це стабільна прибутковість, тобто протягом тривалого часу (хоча б 2 - 3 роки), фонд показує постійну прибутковість. І нарешті, не слід забувати, що прибутковість і ризик ходять пліч-о-пліч. Покориставшись на високу прибутковістьТреба розуміти, що у разі спаду на ринку можна втратити значну частину капіталу. Тож прибутковість прибутковістю, а про коефіцієнти теж забувати не слід.

Вартість чистих активів (СЧА)

Вартість чистих активів ПІФу – це кількість грошей пайовиків, які перебувають під управлінням фонду. З одного боку, велика ВЧА робить портфель фонду громіздким і неповоротким, з другого боку, дозволяє здійснювати більші вкладення. Так що слідуємо принципу - чим більше ВЧА, тим краще ПІФ. Крім того, велика ВЧА, як правило, свідчить про популярність ПІФу та його гарну репутацію.

У будь-якому разі сума чистих активів не є вирішальним критерієм при виборі ПІФу.

Величина витрат

Федеральним законом "Про інвестиційні фонди" встановлено, що витрати керуючої компанії з управління пайовим фондомможуть становити трохи більше 10% середньорічної вартостічисті активи фонду. Тобто на винагороду компанії, що управляє, на оплату послуг депозитарію, оцінювача, аудитора та інших з пайовика не повинно стягуватися більше 10% від вартості паїв, що належать йому. Розмір знижок та надбавок також обмежений. Максимальний розмір надбавки не може становити понад 1,5% вартості паю, а максимальний розмірзнижки – понад 3%. На тлі конкуренції, що посилюється, багато керуючих компаній намагаються мінімізувати свої витрати для залучення інвесторів. Природно, що менше витрати ПІФу, тим більший дохідпайовика. Але з іншого боку, не варто спокушатися малими витратами, особливо якщо мова йдепро початківця керуючої компанії. Краще не економити пару відсотків і довірити свої гроші надійній та авторитетній компанії, що управляє.

Діагноз «хламідіоз» не можна поставити лише за симптомами. Точніше визначити цю хворобу допомагають лабораторні аналізи. Майже кожна лабораторія пропонує кілька аналізів на хламідіоз. Але як не заплутатися у численних методах і точно визначити хламідіоз? Розповідаємо про кожен з них і розуміємо, у чому плюси та мінуси.

Як і як не можна діагностувати хламідіоз?

Кожен метод має свої особливості, а деякі взагалі не можна назвати ефективними. Тому давайте з'ясуємо, що підходить для визначення хламідіозу, а що не варто сприймати всерйоз.

Полімеразна ланцюгова реакція ( ПЛР)

Це один із найнадійніших аналізів на хламідії. Він виявляє бактерію з майже 100% точністю.

За присутністю антитіл, а також за їх кількістю можна зрозуміти: чи є у людини хламідії і якою стадією хламідіозу (гострою чи хронічною) вона хвора. Також ІФАдопомагає визначити, чи вдало пройшло лікування, якщо аналіз здають як контрольний.

Важливо пам'ятати, що це дуже ненадійний. Якщо є вибір, краще скористатися точнішими методами.

Мікроскопія мазка (вона ж бактеріоскопія) за Грамом

Цей метод взагалі не може виявляти хламідій, тому дуже важливо відрізняти його від інших, щоб не робити безглуздий аналіз.

Мікроскопія мазка – це аналіз виділень людини (вагінального слизу, сперми та інших) під мікроскопом за допомогою іншого фарбування – за методом Ганса Грама. Саме його проводять усі платні лабораторії під назвою "загальний мазок", "мікроскопія", або "бактеріоскопія".

Фарбування за Грамом дозволяє побачити різні бактерії, які без фарби непомітні під мікроскопом. Також він допомагає порахувати лейкоцити – вид імунних клітин людини. Але на жаль: метод Грама не може виявляти хламідій, тому що вони просто не фарбуються у такий спосіб.

Аналіз годиться тільки як додатковий - щоб оцінити загальний стан конкретного органу, або при підозрі на інші захворювання.

Хламідіоз за допомогою мікроскопії мазка за Грамом встановити ніяк не можна!

Міні-тест (експрес-тест на хламідії)

Цей метод цілком некорисний. Про нього варто знати, аби не викидати гроші на вітер.

Аналіз можна купити в аптеці та провести самостійно в домашніх умовах. За механізмом дії він дуже схожий із тестом на вагітність: у лунку наноситься кілька крапель сечі або слизу з вагіни, потім результат оцінюють за кількістю смужок.

В інструкції йдеться, що, якщо людина має хламідії, тест покаже дві смужки.

Проте негативний результат тесту не гарантує, що хвороби немає насправді. Позитивний, втім, теж недостовірний. По суті аналіз не повідомляє нічого корисного. Тому за підозри на хламідіоз розумніше здати більш точні аналізи.

Як результат розглянемо порівняльну таблицю всіх аналізів на хламідіоз:

Достовір-

Матеріал Ціна*
ПЛР Мазок або зішкріб, сеча

У крові можуть бути і непрямі ознаки хламідій — антитіла до них; інколи ж — і самі хламідії, якщо інфекція потрапила в кровотік. Спеціальної підготовки, щоб здати аналіз крові на хламідії, не потрібно. Найправильніше здавати кров на голодний шлунок, або хоча б через 4 години після їжі. Антитіла досліджуються за допомогою ІФА, а самі хламідії - за допомогою ПЛР. Якщо в крові виявлені самі хламідії, важливо розуміти, що це серйозний стан. З кровотоку бактерії можуть потрапити до будь-якого органу, де є слизові оболонки, і почати там розмножуватися.

Як підготуватися до аналізу на хламідії?

Щоб результати аналізів були достовірними, потрібно не лише досвід лікарів та лаборантів, а й відповідальність самих пацієнтів: є правила, які не можна порушувати. Розглянемо, як правильно здавати кров на хламідіоз і як підготуватися до мазка на хламідії жінкам (зокрема вагітним) та чоловікам.

Обстеження на хламідіоз потрібно проводити до того, як людина почала приймати антибіотики. Причина в тому, що антибактеріальні препарати вбивають хламідій або заганяють в приховану форму. Виявити бактерії після такого лікування буде дуже важко. Якщо людина приймала будь-які антибіотики за кілька днів до здачі аналізів (наприклад, лікувала ангіну), то перший тест рекомендується здавати лише через місяць після прийому останньої таблетки.

    Якщо пацієнт раніше лікувався місцевими антибактеріальними препаратами (мазями, кремами, розчинами антисептиків), перший аналіз рекомендується здавати лише через 2 тижні після лікування.

    Здавати матеріал із сечівника (слиз/сечу) як чоловікам, так і жінкам потрібно або до сечовипускання, або через 3 години після нього.

    Аналіз на хламідіоз у жінок проводять між менструаціями: не пізніше ніж за 5 днів до менструації, або не раніше, ніж через 5 днів після неї. Бажано, щоб матеріал для аналізу брали першу половину циклу. Однак, якщо у жінки є ознаки сильного запалення, то є сенс здати аналіз якнайшвидше, виключаючи лише період самої менструації. За день до аналізу не можна проводити спринцювання піхви.

    УЗД), чоловікам - в уретру.

    Вагітні жінки здають аналізи за тими самими правилами, що й жінки, які не чекають на дитину. Зрозуміло, ними не поширюються обмеження, пов'язані з менструальним циклом.

У яких випадках перевіряються на хламідіоз: основні свідчення

Основними причинами, через які людині варто здати аналізи на хламідіоз, є:

    гостре або хронічне запалення: сечівника, шийки матки, піхви, прямої кишки, кон'юнктиви ока, ротоглотки, легень (пневмонія або бронхіоліт – у дітей);

    підозра на побутове або статеве зараження хламідіозом - навіть якщо симптомів при цьому немає (безсимптомна форма);

    вагітність, при її ускладненнях: запалення шийки матки, піхви, сечівника, при болях у животі.

    більш серйозні проблеми з вагітністю: викидень, вагітність, що завмерла, інші викидні в минулому;

    безпліддя.

Приклади реальних аналізів

Коли всі результати аналізів є позитивними, поставити діагноз неважко. Але як бути, якщо вони суперечать один одному? Суворих схем для діагностики хламідіозу немає. Щоб правильно поставити діагноз, різні лікарі використовують різні методи та їх поєднання.

Для наочності розглянемо приклади діагнозів реальних пацієнтів:

Серед великої різноманітності лабораторних методів важливо знати, як правильно перевіритись на хламідіоз. Мабуть, основне правило: до діагностики хламідіозу потрібно підходити комплексно – використовувати кілька видів аналізів та зіставляти їх результати. Також пам'ятайте, що оцінювати результати аналізів, як і призначати лікування, має лише лікар.

З існуючих аналізів розумніше вибирати найточніші ПЛР , ІФАта бактеріальний посів. Ті самі аналізи добре підійдуть і для оцінки результатів лікування. Головне – пам'ятати, що ПЛРнемає сенсу здавати раніше, ніж за місяць після курсу антибіотиків.

32 798

Як відомо, будь-яка хвороба має свої, властиві лише їй ознаки. Але це не має жодного відношення до хламідіозу.
Хламідіоз- це хвороба, яка не має чітких симптомів, властивих тільки їй, а іноді й зовсім протікає безсимптомно. І навіть якщо якісь виявляються, то найчастіше вони схожі з ознаками інших ЗПСШ.
Тому для встановлення діагнозу вирішальними є лабораторні методи дослідження. На відміну від багатьох інших захворювань, діагноз хламідіоз – чисто лабораторний.

Хто перш за все повинен обстежитися на хламідіоз?

  • Чоловіки та жінки, які мають багато статевих партнерів, особливо випадкових.
  • Особи, у статевих партнерів яких виявлено хламідіоз, навіть за відсутності скарг та симптомів. Адже ускладнення хламідіозу можуть розвиватися навіть за його безсимптомної течії. Ризик зараження партнера становить близько 90%.
  • Жінки, які страждають на безпліддя більше 2 років, навіть у тому випадку, якщо статевий партнер обстежений і здоровий.
  • Жінки з ерозіями шийки матки, цервіцитами, запаленням яєчників (особливо під час планування вагітності). Причому піхвовий мазок може бути нормальний.
  • Жінки з порушенням перебігу вагітності: мимовільні викидні, передчасні пологи, багатоводдя, підвищення температури неясного походження під час справжньої вагітності.

Що досліджують?
Для виявлення хламідій необхідно провести забір матеріалу. Це може бути зіскрібок, що містить клітини хворого органу - піхви, шийки матки, секрет простати, зіскрібок з уретри, кон'юнктиви ока. Таким матеріалом також може бути кров, сеча та сперма у чоловіків.

Які аналізи призначають при хламідіозі та наскільки вони можуть бути корисними?
Спочатку ми зупинимося на можливих методах обстеження, а потім зробимо висновок, які з них найкращі.

2. Імуноцитологічний аналіз - Реакція прямої імунофлюоресценції (РІФ або ПІФ).
Цей метод передбачає пряме виявлення антигенів хламідій. Для цього матеріал, отриманий при зіскрібці, обробляють спеціальними антитілами, які безпосередньо оброблені флуоресціюючим речовиною. Ці антитіла зв'язуються із специфічними антигенами хламідій. Потім при люмінесцентній мікроскопії хламідійні включення в клітинах визначають за зеленим або жовто-зеленим свіченням.
Імуноцитологічний метод використовується як при гострій, так і при хронічній фазі захворювання.
Істотним недоліком РІФ є велика кількістьхибнонегативних і хибнопозитивних результатів. Хибнонегативні результати найчастіше пов'язані з порушенням правил забору біологічного матеріалу. Хибнопозитивні результати можуть бути наслідком поєднаних інфекцій урогенітального тракту, коли разом з хламідії є інша мікробна флора. До того ж, РИФ носить дуже суб'єктивний характер, т.к. залежить від досвіду та особистої оцінки лаборанта. Тому РІФ дає дуже високий відсотокхибнопозитивних результатів і може вважатися достовірним. Недоліком РІФ також є те, що за її допомогою не можна оцінити результати лікування.
При урогенітальному хламідіозі точність методу становить близько 50%.

3. Імуноферментний аналіз (ІФА).
ІФА є способом непрямого виявлення бактерій, тобто. збудник не виявляється безпосередньо, а визначаються специфічні антитіла (IgG, IgA, IgM) щодо нього. В основі методу лежить здатність імунної системи виробляти антитіла ( імуноглобуліни, Ig) у відповідь на використання чужорідних агентів.
Переваги ІФА полягають у тому, що він дозволяє не тільки виявити збудника захворювання, але також визначити, на якій стадії воно знаходиться (гострої чи хронічної) та оцінити ефективність проведеного лікування. Перевагою також є автоматизація методу та швидкість його проведення.

Як оцінюють результати?
При інфікуванні хламідіями специфічні антитіла з'являються на 5-20 день захворювання. При цьому поява кожного класу антитіл відбувається на певній стадії захворювання.

  • При первинному інфікуванні спочатку з'являються IgМ, потім IgA, і в останню чергу IgG.
  • Найпершими після первинного інфікування (через 5 днів) є IgM, які захищають організм від можливого поширення інфекції. Вони є маркерами гострої стадії захворювання. До 10-го дня кількість IgM у крові досягає піку. Потім їхній рівень починає знижуватися, і з'являються IgA. Протягом невеликого періоду часу можуть виявлятися паралельно IgM та IgA антитіла. Цей період свідчить про розпал інфекційного процесу.
  • IgA можна виявити через 10 днів з моменту появи первинних симптомів захворювання. Вони захищають слизові оболонки від проникнення бактерій у тканини. Високий рівень IgA у виділеннях слизових оболонок говорить про добре функціонуючий місцевий імунітет.
  • Потім, через 15-20 днів після впровадження в організм Chlamydia trachomatis в крові з'являються IgG, а рівень IgA знижується.
  • Гострий первинний процес характеризується високим рівнем(титром) IgM у поєднанні з низьким титром IgG.
  • При повторному зараженні відзначається швидке наростання титру IgG та IgА та практично повна відсутність IgM.
  • При хронічній течії виявляються специфічні IgG та А, концентрації яких не змінюються протягом тривалого часу.
  • При лікуванні через 1,5-2 місяці IgA та IgM у крові не виявляються, а IgG можуть зберігатися протягом кількох років, проте їхній рівень знижується у 4-6 разів.
  • Довго виявляються IgG вказують на перенесену хламідійну інфекцію.
  • При загостренні хламідіозу кількість IgA та IgG збільшується у кілька разів.
  • Ефективність проведеного лікування визначається наявністю IgA. Якщо через 2 місяці після курсу лікування в крові виявляються IgA, це означає, що інфекція залишилася.

Необхідно відзначити, що специфічні антитіла, що виробляються до хламідій, не забезпечують стійкого імунітету проти них.
Точність цього аналізу на хламідіоз становить близько 70%. Це пов'язано з тим, що антитіла до хламідій можуть бути присутніми і у здорових людей внаслідок раніше перенесеного захворювання, а також визначатися при респіраторних та інших видах хламідійних інфекцій.

4. Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР).
За допомогою ПЛР виявляється специфічна ділянка або фрагмент ДНК хламідій у матеріалі, що досліджується, тому в порівнянні з іншими методами сплутати хламідії з якоюсь іншою інфекцією неможливо. Він ефективний як у гострій, так і в хронічній фазі захворювання. При цьому для аналізу потрібно зовсім небагато матеріалу, результати ж готові вже через 1-2 дні.
Для ПЛР дослідження матеріалом може бути зіскрібок з уретри або цервікального каналу, секрет передміхурової залози, осад сечі, зіскрібок з кон'юнктиви очей, кров.
При діагностиці первинного зараження найінформативнішим є виявлення цієї інфекції у місцях початкової локалізації, тобто. матеріалом повинні бути зіскрібки зі статевих шляхів. Хибнопозитивні результати ПЛР можуть бути у разі порушення процесу забору, транспортування матеріалу та проведення самого аналізу.

Важливо!
Для оцінки ефективності лікування ПЛР дослідження не можна проводити раніше, ніж за місяць після курсу антибіотикотерапії, т.к. можна отримати хибнопозитивні результати. Це з тим, що з виявленні фрагмента ДНК хламідії неможливо оцінити, наскільки життєздатна сама мікробна клітина. І тут життєздатність хламідій, і навіть пов'язана з нею можливість рецидивів хвороби оцінюється з допомогою мікробіологічного методу. Якщо хламідія нежиттєздатна, то, незважаючи на наявність фрагмента ДНК, мікробні клітини не зростатимуть у клітинній культурі.
На сьогоднішній день точність цього методу є найвищою – до 100%.

5. Цей метод рекомендований як кращий у діагностиці хламідійної інфекції.
Мікробіологічне дослідження (культуральний метод) із визначенням чутливості до антибіотиків.
Суть цього методу полягає в тому, що досліджуваний матеріал висівається на спеціальне середовище та вирощується. Потім характером зростання та інших ознак ідентифікується збудник. Культуральний метод є найбільш чутливим, він дозволяє не тільки виявити життєздатні хламідії, але й підібрати антибіотик, до якого чутливий цей мікроорганізм.
Матеріалом для досліджень може служити зіскрібок з уретри, шийки матки, секрет простати, зіскрібок з кон'юнктиви ока.
За місяць до дослідження не можна застосовувати антибіотики.

  • Мікробіологічне дослідження краще проводити в наступних випадках:
  • З метою оцінки ефективності проведеного антибактеріального лікування.
  • Для виявлення чутливості до антибактеріальних препаратів.

Для виявлення хламідій у осіб з імунодефіцитами (ВІЛ інфіковані, онкологічні хворі після променевої та хіміотерапії, особи, які отримують імунодепресанти, ін.). Недоліками культурального методу діагностики хламідіозу є трудомісткість, дорожнеча та тривалість дослідження. Також потрібне особливе оснащення лабораторії та дуже висока кваліфікація персоналу. Крім того,, Як ніякий інший, вимагає бездоганного дотримання правил при заборі матеріалу, транспортуванні та зберіганні.
Реальний термін отримання результатів цим методом – щонайменше сім днів.
Виявлення хламідій при сівбі становить до 90%.

6. Експрес-діагностика.
В основі всіх методів експрес-діагностики хламідіозу лежить ферментспецифічна реакція та імунохроматографія. Для цього використовують спеціальні набори для експрес-діагностики, які дозволяють візуально оцінювати результати вже через 10-15 хвилин. Це дуже швидкий і зручний метод, але його точність складає лише 20-25%.

Висновки.

  • Немає жодного методу, який у 100% випадків виявляв хламідії. Тому в більшій частині випадків лабораторна діагностика повинна включати поєднання не менше двох методів.
  • Найчутливіші аналізи на хламідіоз – ПЛР (ДНК – діагностика) та мікробіологічний аналіз. Вони є " юридичним стандартом» при діагностиці хламідіозу.
  • У разі первинного зараження до застосування антибіотиків найчастіше достатньо одного ПЛР дослідження.
  • При хронічних процесах ПЛР або мікробіологічний тест, або РІФ + ІФА.
  • За ймовірності переходу збудника в L-форму – ІФА.
  • Для оцінки ефективності лікування в ідеалі використовують мікробіологічне дослідження. За неможливості його проведення – ПЛР + ІФА.
  • Для визначення стадії хвороби – ІФА.
  • У хворих на імунодефіцити ІФА не інформативний, в ідеалі використовувати мікробіологічний метод.
  • Не варто особливо покладатися на результати визначення чутливості хламідій до антибіотиків. Адже, як відомо, мікроорганізми поводяться по-різному в пробірці (in vitro) та живому організмі (in vivo).

Хламідійна інфекція викликається Chlamydia trachomatis- грамнегативною бактерією, що належить сімейству Chlamydiaceae. Вид Chlamydia trachomatisвключає різні серовари, що викликають окремі нозологічні форми захворювань. Сероварова A, B, C викликають трахому, L1, L2, L3 - венеричну лімфогранулему. Найбільшого поширення у країнах Європи, Південної та Північної Америки та в Росії набули серовари DK, які передаються при статевих контактах і викликають урогенітальну хламідійну інфекцію (УХІ). Можлива перинатальна передача з розвитком новонароджених кон'юнктивіту або пневмонії. C.trachomatisмає унікальний серед інших збудників ІПСШ життєвий цикл. Інфікування епітеліальних клітин відбувається метаболічно неактивними формами хламідій – елементарними тільцями (ЕТ). Усередині клітин ЕТ трансформуються в ретикулярні тільця (РТ) – метаболічно активні форми, що діляться. Накопичення всередині епітеліальних клітин нових генерацій РТ та їх паралельна трансформація назад у ЕТ виснажує ресурси клітин господаря, призводячи їх до загибелі, вивільнення ЕТ та нового циклу інфікування. Неускладнена хламідійна інфекція протікає у чоловіків найчастіше у формі уретриту, у жінок – у формі слизово-гнійного цервіциту. Симптоми та прояви УХІ неспецифічні, для встановлення діагнозу УХІ необхідні лабораторні дослідження для виявлення збудника або його маркерів. Значна частина випадків УХІ – від 40 до 60% протікає у безсимптомній чи малосимптомній формі та проявляється вже на стадії ускладнень. Основними ускладненнями УХІ є: епідидиміт, ендометрит, сальпінгіт, сальпінгоофорит, позаматкова вагітність, трубна безплідність, хвороба Рейтера.

Показання до призначення лабораторних досліджень.У чоловіків:наявність симптомів та клінічних проявів уретриту, епідидиміту або епідидимоорхіту; в осіб, які практикують аногенітальні контакти – проктиту; при фізикальному огляді – наявність виділень із уретри.

У жінок:наявність симптомів запального процесу у нижніх відділах урогенітального тракту та органах малого тазу, болі в низу живота, патологічні виділення з піхви; наявність слизових або слизово-гнійних виділень із цервікального каналу, порушення менструального циклу, болючість при статевих контактах; підготовка до хірургічного втручання органів малого таза; підготовка до вагітності, обтяжений акушерсько-гінекологічний анамнез, пов'язаний із інфекційною патологією.

В осіб обох статейбез симптомів та ознак запального процесу урогенітального тракту: наявність перерахованих вище симптомів та ознак або встановлена ​​УХІ у статевого партнера; у віковій групі до 25 років – численні статеві партнери або статеві контакти з новим статевим партнером без бар'єрної контрацепції.

Диференційна діагностика.Гонорея, урогенітальний трихомоніаз, інфекція, спричинена M.genitalium.

Етіологічна діагностика включаєвізуальне виявлення C.trachomatis, виділення культури C.trachomatis, виявлення АГ, ДНК та РНК C.trachomatisта АТ до мікроорганізму.

Матеріал для досліджень

  • Мазки/зіскоби зі слизових оболонок цервікального каналу та уретри жінок – мікроскопічні дослідження, культуральні дослідження, виявлення артеріальної гіпертензії, виявлення ДНК, РНК;
  • мазки/зіскоби зі слизової оболонки піхви, мазки (зіскоби) зі слизової оболонки прямої кишки - виявлення ДНК, РНК;
  • мазки/зіскоби з кон'юнктиви очей – культуральні дослідження, виявлення ДНК;
  • сеча (у чоловіків) – виявлення ДНК;
  • сироватка крові – виявлення АТ.

Порівняльна характеристика методів лабораторної діагностикиДля візуального виявлення C.trachomatisможливе застосування світлової чи люмінесцентної мікроскопії. При застосуванні світлової мікроскопії використовується фіксований препарат біологічного матеріалу, забарвлений по Романівському-Гімзі, в якому виявляють змінені клітини циліндричного епітелію, що містять ЕТ та РТ. C.trachomatis, що отримали назву тілець Гальберштедтера Провачека Діагностична чутливість дослідження вбирається у 10%. Поширеним прийомом виявлення хламідій є визначення артеріальної гіпертензії мікроорганізму методом ПІФ. За допомогою люмінесцентної мікроскопії в препараті, обробленому флуоресцентно-міченими АТ до хламідій, характерним світінням виявляються ЕТ C.trachomatis. Мікроскопічні дослідження, насамперед ПІФ, досить прості у виконанні і не вимагає дорогого обладнання, проте дуже вимогливі до якості отриманого біологічного матеріалу, техніки нанесення препарату на скло та специфічності АТ. Матеріал для виконання ПІФ повинен містити достатню кількість клітин циліндричного епітелію, його одержують із цервікального каналу (за показаннями – з уретри) та у чоловіків із передньої уретри. Для інтерпретації результату необхідна наявність у препараті не менше 5–10 клітин циліндричного епітелію (відображає якість отримання біоматеріалу) у полі зору та не менше 10 флуоресціюючих ЕТ. Діагностична чутливість методу ПІФ варіює у межах – від 10 до 65%. Максимальна чутливість та специфічність методу відзначена у пацієнтів з клінічними проявами інфекції та високим бактеріальним навантаженням, мінімальна – при безсимптомних або малосимптомних формах.

Для культивування C.trachomatisв умовах in vitro використовуються чутливі до мікроорганізму еукаріотичні клітинні лінії – HeLa, McCoy, L-929, у яких відбувається розвиток хламідій. У процесі дослідження ЕТ, що містяться в біологічному матеріалі, інфікують чутливі клітини культури та розмножуються у них. Через 48-72 години після зараження в культурі накопичуються клітини, що містять включення - РТ і ЕТ, що розмножилися. Результат культурального дослідження візуально оцінюється при використанні методу ПІФ за допомогою люмінесцентної мікроскопії. Культуральний метод тривалий час розглядався як «золотий стандарт» діагностики, оскільки мав більшу чутливість у порівнянні з методом світлової мікроскопії та імунологічними методами при практично 100% специфічності. Однак ефективність методу значною мірою залежить від стану клітинної лінії, що використовується – її життєздатності та сприйнятливості до інфікування хламідіями, на які можуть надавати негативний впливпродукти життєдіяльності, що містяться в біологічному матеріалі, антибіотики, місцеві бактерицидні препарати, хімічні компоненти урогенітальних зондів та тампонів та ін. Іншою важливою умовою є збереження життєздатності самих хламідій у досліджуваному біологічному матеріалі. Діагностична чутливість методу з урахуванням зазначених факторів варіює від 40 до 85%.

Для виявлення АГ C.trachomatisза кордоном було розроблено ряд тестів на основі ІФА. Діагностична чутливість виявлення артеріальної гіпертензії C.trachomatisзнаходиться в межах 55-78%. Зазначені тести набули широкого поширення у зарубіжній лабораторній практиці, проте в РФ не застосовуються.

Виявлення АТ класів IgA, IgM та IgG до АГ C.trachomatisу крові здійснюється методами МІФ чи ІФА. Метод МІФ розглядається як «золотий стандарт» визначення АТ до АГ хламідій, що дозволяє проводити серотипування. При визначенні АТ IgM МІФ має більшу чутливість, ніж ІФА, що важливо при діагностиці хламідійної інфекції у новонароджених. Однак дослідження досить трудомістке і вимагає дорогих високоочищених АГ C.trachomatisТому метод ІФА набув найбільшого поширення в міжнародній та вітчизняній практиці. Виявлення АТ IgA може свідчити про наявність гострої або загострення хронічної інфекції. Для правильної оцінки результатів визначення АТ за допомогою ІФА необхідно враховувати декілька важливих умов. При неускладненій УХІ основну роль відіграє місцева ланка імунної системи за участю специфічних та неспецифічних факторів. На терміни появи та рівень циркулюючих у крові АТ впливають індивідуальна імунологічна реактивність організму, терміни інфікування, тривалість інфекції, повторні випадки інфікування, рівень бактеріального навантаження та цілий ряд інших факторів. Тому АТ у крові можуть з'являтися у строк від кількох тижнів до кількох місяців після інфікування. Елімінація АТ може відбуватися протягом декількох років або зберігатися практично на все життя.

Для виявлення ДНК C.trachomatisв РФ використовують переважно ПЛР з різними варіантамидетекції продуктів реакції та метод виявлення РНК C.trachomatisна основі НАСБА. Діагностична чутливість методу ПЛР для діагностики УХІ знаходиться в межах від 90% до 98%, специфічність досягає 96-98%. Діагностична чутливість методу НАСБА сягає 98%, діагностична специфічність – до 100%.

Показання для застосування різних лабораторних досліджень.Мікроскопічне дослідження препаратів із забарвленням по Романовському-Гімзі нині не використовується і не рекомендується для діагностики УХІ. У той же час, усім пацієнтам із симптомами та клінічними проявами урогенітальної інфекції показано мікроскопічне дослідження з забарвленням за Грамом для встановлення лабораторних ознак запалення (підвищений вміст ПМЯЛ).

Застосування методу ПІФ є доцільним як метод швидкої діагностики за наявності у пацієнтів виражених проявів інфекційно-запального процесу в урогенітальному тракті за умови дотримання всіх вимог отримання біологічного матеріалу. Метод не підходить для скринінгу, діагностики хронічних форм хламідійної інфекції, контролю лікування та дослідження зразків сечі та слизової оболонки піхви, прямої кишки, ротоглотки.

З урахуванням того, що для проведення культурального дослідження необхідна технологія ведення еукаріотичних клітинних ліній та відповідні для цього лабораторні умови, застосування методу в рутинній лабораторній практиці обмежене. Метод в першу чергу має велике значення в наукових дослідженняхколи потрібно виділити живий збудник для його подальшого вивчення.

Визначення АТ до C.trachomatisможе бути використано для епідеміологічних досліджень, з метою інтегральної оцінкичастки осіб у популяції, що контактувала з C.trachomatis. У клінічній практиці визначення АТ показано при ретроспективному аналізі можливої ​​хламідійної етіології при безплідді, тривалих хронічних запальних процесах урогенітального тракту. Однак і в цьому випадку позитивні результати виявлення АТ повинні розглядатись у контексті інших клінічних, анамнестичних та лабораторних даних.

В даний час виявлення ДНК методом ПЛР вважаються основою лабораторної діагностики УХІ. Дослідження показано і контролю результатів лікування. При використанні методу ПЛР з урахуванням швидкості елімінації ДНК C.trachomatisКонтроль лікування необхідно проводити не раніше 3-4 тижнів. РНК збудника є більш раннім маркером відповіді на терапію, тому за допомогою методу НАСБА можна оцінювати ефективність лікування через 1-2 тижні після закінчення курсу.

Особливості інтерпретації результатів лабораторних досліджень.Результати, отримані методом ПІФ, рекомендується підтверджувати культуральним або молекулярно-біологічними методами.

Позитивні результати культурального дослідження не потребують додаткового підтвердження та означають наявність інфекції. Негативний результат означає відсутність збудника, так і може свідчити про неоптимальні умови для його культивування.

При виявленні ДНК C.trachomatisу пацієнтів з клінічною симптоматикою урогенітальної інфекції або наявності факторів, що сприяють інфікуванню, додаткового дослідження не потрібне, діагноз урогенітальної інфекції вважається встановленим. У пацієнтів, у яких виявлено ДНК C.trachomatis, але відсутні суб'єктивні та об'єктивні ознаки інфекційно-запального захворювання та фактори ризику, для підтвердження діагнозу рекомендується провести дослідження для виявлення РНК C.trachomatisметодом НАСБА. Наявність ДНК та РНК патогену є об'єктивною лабораторною ознакою інфекції.

При оцінці результатів виявлення АТ слід враховувати, що їх наявність або відсутність не відображає наявність або відсутність інфекції в Наразічасу.